提要目的探讨急性白血病(ADCD34抗原表达和P-gp高表达与预后的关系。方法对30例AL患者的单个核细胞用抗CD34和抗Pgp同时高表达可作为AL预后不良的指标。
P―gp急性白血病预后备检。
1.2.2间接免疫荧光标记:将1X106/ml细胞以PBS液洗涤2次,弃上清,加入1:10稀释的抗P―gp的单克隆抗体UIC2(或抗CD34单抗)10(M,37*C水浴温育30分钟,PBS洗涤,弃上清,加入1:200稀释的羊抗鼠异硫氰酸荧光素(FITC―IgG)离心洗涤多余的抗体,上机前加PBS1.0ml,经500目筛网过滤。
1.2.3流式细胞仪检测方法:采用FACS420型流式细胞仪,激光光源2W氢离子激光器。输出功率计算机。
结果判断:以P―gp表达率>2%为高表达(+),30%作为阳性表达(+),<30%为阴性表达(一)。 1.3治疗方案和疗效判定1.3.1初治患者的诱导化疗方案:ANLL以DA(柔红霉素+阿糖胞苷)或MA(米托蒽醌+阿糖胞苷)3+7方案为主,ALL以VDLP的28天方案为主。 要编码产物P―糖蛋白(P―gp)高表达,是导致肿瘤细胞耐药、预后不良的原因。本文对1999年1月~2002年1月间住院的AL患者的P-gp和CD34抗原表达情况进行分析,探讨其与临床疗效的关系,现报道如下。 1材料与方法1.1临床资料初诊AL患者30例,根据FAB诊断标准,急性非淋巴细胞白血病(ANLL)16例(M,2例,M2a6例,M4a2例,M4c2例,M5a1例,M5b1例),急性淋巴细胞白血病(ALL)13例(Li5例,L26例,L32例),急性混合细胞白血病(MAL)1例。男14例,女16例,中位年龄38岁(18~78岁),大多数经免疫学分型及细胞遗传学证实。所有病例同时进行CD34和P―gp检测。 1.2检测方法1.2.1标本:取用肝素抗凝的骨髓液2ml缓慢注入淋巴细胞分离液上层,密度梯度离20分钟(2000r/ min),吸取上层单个核细胞,用RPMI1640洗涤3次,1.3.2疗效判定:疗效好的标准:①1个疗程达到完全缓解(CR);②1个疗程未缓解但外周血白细胞*低时骨髓白血病细胞下降指数(MBDI)>60%.疗效差的标准:未达到上述指标。
2结果表1gp在AL的表达组别2.2CD54和P*gp表达与临床疗效(见表2)。
gp表达与临床疗效关系例数疗效好疗效差合计4组中临床疗效好所占的比例由小至大依次为P*gp+/CD34患者的临床疗效*好,二者差异有显著性较,差异有显著性意义(p<0.05)。3讨论P―gp是多药耐药基因MDR1编码产生的膜蛋白,它能把细胞内的化疗药物泵出细胞外而产生抗药性,导致临床预后不良。本文对同时检测了CD34和P-gp的30例AL患者作回顾性分析,发现其表达情况与临床疗效存在一定关系:①CD34和P―gp的表达在ALL和ANLL中,差异无显著性意义0.05);②在P―gp高表达的13例中临床疗效好的仅3例(3%)CD34阳性表达的15例中疗效好的6例(40%),二者差异有显著性意义(p<0.05),可见单用CD34与P*gp相比,P*gp高表达更能提示临床疗效差。③单纯CD34阳性表达的是否具有独立预后价值,目前尚未明了,本文观察到当时单纯CD34阳性表达、临床疗效好的2例患者,在坚持巩固、强化治疗的基础上,仍在半年内复发,因而对该种表达需要更多病例作长时间的观察,才能得出结论。④在8例CD34和P一gp同时高表达的病例中,仅1例临床疗效好;10例P*gp和CD34抗原阴性表达的,其临床疗效好的比例占100%,CD34和P*gp同时高表达的病例几乎均预示其预后不良,比单独用上述两项指标更具有临床指导意义。
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