一、原理简介
改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，*后低盐的RNasefreewater将纯净RNA（microRNA）从硅基质膜上洗脱。
二、试剂盒特点
1．离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2．结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3．独有的MRL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。
4．多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。
三、注意事项（实验前必须首先阅读这部分！）
1．为防止RNA降解，所有离心步骤如未加说明，均在4℃低温进行。使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf5415C或者类似离心机。
2．裂解液MRL中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3．预防RNase污染，在实际的操作中应遵循以下指南（参见《分子克隆》）*全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌，可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。*使用灭菌的、一次性的塑料器皿和自动吸管抽提RNA，避免使用公共仪器所导致的RNA酶交叉污染。*使用无RNA酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。玻璃器皿可以在150°C的烘箱中烘烤4小时，塑料器皿可以在0.5MNaOH中浸泡10分钟，用水彻底漂洗干净后高压灭菌备用。
4．考虑到环保问题，本试剂盒不含有实验室常用试剂，用户使用前需要自备。
5．常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析大RNA的质量。好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为~5Kb（28S），~2Kb（18S），条带亮度比值约为2：1。
6．检测OD260/OD280吸光度比值时，RNA样品应该溶于TE后检测，如果用水稀释后检测，由于一般水离子强度和PH值低，会使OD280升高，从而使比值降低。
7．加入裂解液MRL匀浆后，加前，样品可在–60℃-70℃保存一个月以上。
五、操作步骤
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